一、基础介绍生物素 - 氨基己二酸Biotin-Aminoadipic acid亲和探针依托生物素 - 链霉亲和素富集系统结合 Pull-downLC-MS 蛋白质组学直接捕获氨基己二酸结合蛋白是赖氨酸代谢、微生物药物合成、疾病代谢研究核心化学工具。探针模块化结构氨基己二酸骨架 Linker烷基 / PEG4 生物素二、合成路线氨基己二酸的两性离子结构是分子识别基础修饰必须做到单点选择性衍生最大程度保留 α-NH₂与游离羧基。核心原则选择性修饰远端羧基保留 α 位氨基以及另一侧羧基维持天然分子电荷分布。远端羧基选择性偶联路线【Pull-down 首选方案】合成路线1.采用正交保护策略保护 α- 氨基2.优先选择碳链末端远端羧基活化与两端氨基 Linker 缩合3.脱保护释放游离 α- 氨基Linker 末端伯氨基与 Biotin-LC-NHS / Biotin-PEG4-NHS 酰胺偶联4.制备型 C18 反相 HPLC 分离单取代产物去除游离生物素、双取代杂质冻干纯化。完整保留 α- 氨基与一个羧基最大程度复刻天然氨基己二酸理化性质酰胺键在生理水溶液稳定不易水解。 Linker 推荐优先选用PEG4 柔性接头提升水溶性降低静电引发的非特异性蛋白吸附。三、理化性质与储存方法1.外观白色冻干粉末2.溶解性水溶性优异纯水、PBS、微生物培养液、细胞培养基均可溶解亦可溶于 DMSO3.稳定性无光敏特性水溶液不宜长期存放易滋生微生物工作液现配现用4.保存条件 固体粉末-20℃密封避光干燥长期保存 储备液分装-80℃冻存禁止反复冻融。5.强制质控标准① HPLC 纯度检测② HRMS 分子量验证③ 活性对照实验和游离氨基己二酸对比确认探针保留生物学结合能力。生物素-甘油磷酸钠盐Biotin-Putrescine生物素-昆布多糖Biotin-ALCARBiotin-HydrazideBiotin-AbacavirBiotin-CD环糊精生物素-人参皂苷Rg1Biotin-vitamin B1生物素-苯乙酰谷氨酰胺Biotin-Amphotericin B生物素-异牡荆素生物素-薯蓣皂苷生物素-烟酰胺生物素-谷胱甘肽生物素-3,4-二羟基苯丙酸生物素-α-苯乙胺生物素-水解蚕丝蛋白生物素-脱落酸生物素-左旋肉碱Biotin-Polymyxin B生物素-维替泊芬生物素-隐绿原酸生物素-血蓝蛋白生物素-木瓜蛋白酶
一、基础介绍生物素 - 氨基己二酸Biotin-Aminoadipic acid亲和探针依托生物素 - 链霉亲和素富集系统结合 Pull-downLC-MS 蛋白质组学直接捕获氨基己二酸结合蛋白是赖氨酸代谢、微生物药物合成、疾病代谢研究核心化学工具。探针模块化结构氨基己二酸骨架 Linker烷基 / PEG4 生物素二、合成路线氨基己二酸的两性离子结构是分子识别基础修饰必须做到单点选择性衍生最大程度保留 α-NH₂与游离羧基。核心原则选择性修饰远端羧基保留 α 位氨基以及另一侧羧基维持天然分子电荷分布。远端羧基选择性偶联路线【Pull-down 首选方案】合成路线1.采用正交保护策略保护 α- 氨基2.优先选择碳链末端远端羧基活化与两端氨基 Linker 缩合3.脱保护释放游离 α- 氨基Linker 末端伯氨基与 Biotin-LC-NHS / Biotin-PEG4-NHS 酰胺偶联4.制备型 C18 反相 HPLC 分离单取代产物去除游离生物素、双取代杂质冻干纯化。完整保留 α- 氨基与一个羧基最大程度复刻天然氨基己二酸理化性质酰胺键在生理水溶液稳定不易水解。 Linker 推荐优先选用PEG4 柔性接头提升水溶性降低静电引发的非特异性蛋白吸附。三、理化性质与储存方法1.外观白色冻干粉末2.溶解性水溶性优异纯水、PBS、微生物培养液、细胞培养基均可溶解亦可溶于 DMSO3.稳定性无光敏特性水溶液不宜长期存放易滋生微生物工作液现配现用4.保存条件 固体粉末-20℃密封避光干燥长期保存 储备液分装-80℃冻存禁止反复冻融。5.强制质控标准① HPLC 纯度检测② HRMS 分子量验证③ 活性对照实验和游离氨基己二酸对比确认探针保留生物学结合能力。生物素-甘油磷酸钠盐Biotin-Putrescine生物素-昆布多糖Biotin-ALCARBiotin-HydrazideBiotin-AbacavirBiotin-CD环糊精生物素-人参皂苷Rg1Biotin-vitamin B1生物素-苯乙酰谷氨酰胺Biotin-Amphotericin B生物素-异牡荆素生物素-薯蓣皂苷生物素-烟酰胺生物素-谷胱甘肽生物素-3,4-二羟基苯丙酸生物素-α-苯乙胺生物素-水解蚕丝蛋白生物素-脱落酸生物素-左旋肉碱Biotin-Polymyxin B生物素-维替泊芬生物素-隐绿原酸生物素-血蓝蛋白生物素-木瓜蛋白酶
